Flavie ADER – Identification de variants du gène FLNC dans les cardiomyopathies humaines et modélisations fonctionnelles chez la drosophile et dans des pseudo-tissus cardiaques – December 8 2021 – School of Medicine (105) – Salle 26 – 13h45
Mots-clés
Cardiomyopathie, Filamine C, modèles, hiPSC, CRISPR/Cas9, Drosophila, EHT
Résumé
Des variants du gène FLNC ont été impliqués dans le développement de cardiomyopathies (CM), toutefois les mécanismes de physiopathologie ne sont pas entièrement élucidés. Ce travail a comporté la caractérisation génétique d’une cohorte clinique puis le développement d’un modèle cellulaire et d’un modèle Drosophile pour confirmer la pathogénicité de variants faux sens et d’évaluer les conséquences fonctionnelles des mutants FLNC.
L’étude de 1150 patients atteints de CM a permis d’établir la prévalence du gène FLNC entre 1 et 8 %. De plus, les variants tronquants ont été associés préférentiellement à des CM dilatées (CMD) avec un risque rythmique accru et les variants faux sens (régionalisés dans le ROD2 de la protéine) à des CM hypertrophiques (CMH).
Chez la drosophile, la perte de fonction de l’orthologue du gène FLNC (ARN interférence) a montré une dilatation cardiaque et une diminution de la fraction d’éjection chez l’adulte, associées à une désorganisation des sarcomères et du réseau d’actine. Les 3 variants faux sens sélectionnés, identifiés dans des CMH, et introduits par CRISPR/Cas9 dans des Drosophiles n’ont pas montré d’effet fonctionnel ou histologique significatif. L’étude de lignées produisant une protéine tronquée a permis d’établir que le domaine C-terminal de la filamine n’était pas requis pour la fonction cardiaque chez la Drosophile.
Un clone hiPSC édité par CRISPR/Cas9 portant une délétion homozygote du site d’épissage de l’exon 42 qui aboutit à un saut en phase de l’exon a été différencié en cardiomyocytes. Les cardiomyocytes amplifiés ont permis de former des pseudo-tissus cardiaques battant dont l’analyse a montré une modification du phénotype rythmique qui correspondrait à un phénotype de CMD.
En conclusion, ce travail a permis de montrer l’importance du gène FLNC dans le développement des CM et de développer 2 nouveaux modèles pour étudier les mécanismes de pathogénicité et développer des thérapeutiques ciblées.